與其他類(lèi)型相比，對(duì)用于這種填料的硅膠基質(zhì)并沒(méi)有特殊的要求，只要孔徑在25-100nm之間且有較大的比表面積就可以應(yīng)用，與對(duì)CPG的要求相似。只要經(jīng)過(guò)表面修飾或涂層，使其具有合適的親水表面和較弱的疏水基，就可以制備出疏水作用色譜。
    盡管曾研究過(guò)不同類(lèi)型的疏水作用固定相，但有實(shí)用價(jià)值的主要是兩類(lèi)。一類(lèi)是在基質(zhì)表面鍵合上短鏈烷烴或苯基而成，例如，TOSOH公司的Pheny- TSK -Gel 3000SW、Butyl-TSK 3000 SW柱均是很典型的商品HPHIC柱。另一類(lèi)是醚型鍵合相。在硅膠上先鍵合上環(huán)氧丙氧基三乙氧基硅烷，再在路易士酸催化下接上短鏈烷氧基而成

               

如果將聚乙二醇與環(huán)氧化硅膠反應(yīng)，則可制備出聚乙二醇型HIC 填料。作者的實(shí)驗(yàn)室曾以可控孔徑玻璃為基質(zhì)，鍵合以聚乙二醇，制備出HIC填料。這種填料，系無(wú)定型顆粒，粒徑分25-37及5-10μm 兩種。孔徑有30、60 以及100nm等幾種。使用了分子量為400、600、800、1000及2000的PEG為配基，研究了不同色譜條件下蛋白質(zhì)的分離行為。結(jié)果表明隨 PEG鏈長(zhǎng)的增加，蛋白質(zhì)的保留加大，比較適宜的是PEG600-1000。對(duì)一般生化分離而言，孔徑30-60nm較為合適。以結(jié)晶胰蛋白酶為樣品， 經(jīng).:( 分離后的活性回收率為近100%，表明這種.:( 填
料很適合于蛋白質(zhì)的分離。耿信篤等以硅膠為基質(zhì)，以改性聚乙二醇為配基，制備了用 于蛋白質(zhì)分離的HIC 填料。在分離基因重組γ- 干擾素時(shí)發(fā)現(xiàn)，干擾素的活性回收率有異乎尋常的升高。經(jīng)研究后認(rèn)為，這是由于HIC分離過(guò)程有利于變性蛋白的復(fù)性所致。這更加說(shuō)明，HIC是生物大分子分 離和純化的一個(gè)重要的手段。